逆轉(zhuǎn)錄病毒的研究，除了細(xì)胞學(xué)研究，還需要大量的分子生物學(xué)研究，因此，對(duì)于實(shí)驗(yàn)室的衛(wèi)生要救也更高。德國(guó)MB公司生產(chǎn)的PCR Clean

為了順利感染宿主細(xì)胞，逆轉(zhuǎn)錄病毒必須將其逆轉(zhuǎn)錄RNA基因組的DNA拷貝整合到宿主染色體中。因此，核膜(NE)是防止逆轉(zhuǎn)錄病毒感染的屏障。大多數(shù)逆轉(zhuǎn)錄病毒依靠有絲分裂NE分解進(jìn)入細(xì)胞核，因此只感染增殖細(xì)胞。然而，慢病毒，如HIV-1，是例外的，因?yàn)樗鼈兏腥揪哂型暾?span>NEs的非分裂細(xì)胞。在該過(guò)程中，通過(guò)核孔復(fù)合物(npc)是很重要的的步驟。

NPCs的質(zhì)量約為100 MDa，并為核細(xì)胞質(zhì)運(yùn)輸提供通道由通透性屏障控制。核轉(zhuǎn)運(yùn)受體(NTRs)能夠主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)，以便利的方式穿過(guò)NPCs，并在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)之間循環(huán)。進(jìn)口蛋白β超家族的成員代表了最大的NTR類。它們從rangtp系統(tǒng)中獲取能量，以rangtp控制的方式捆綁貨物，并將它們轉(zhuǎn)移到NPC的屏障上。NPC由大約30種不同的核孔蛋白(Nups)構(gòu)建，包括大約10種所謂的FG-Nups，它們將屏障形成的苯丙氨酸-甘氨酸(FG)重復(fù)結(jié)構(gòu)域錨定在NPC支架上。

FG結(jié)構(gòu)域具有較低的序列復(fù)雜性，本質(zhì)上是無(wú)序的，并且包含許多FG二肽基序，這些基序在易位過(guò)程中與NTRs結(jié)合。Nup98的FG結(jié)構(gòu)域及其同源性的特殊之處在于它們出現(xiàn)在非常高的拷貝數(shù)中，并且在每個(gè)NPC中貢獻(xiàn)了最多的FG質(zhì)量。它們具有最高的FG基序計(jì)數(shù)(約50個(gè))和密度(約每12個(gè)殘基中有一個(gè))。水是這些FG結(jié)構(gòu)域的不良溶劑;因此，它們很容易從稀水溶液中相分離，形成蛋白質(zhì)密度很高(約400mg ml?1)的FG相。由此產(chǎn)生的內(nèi)聚FG相非常好地再現(xiàn)了核轉(zhuǎn)運(yùn)選擇性，排除了惰性分子，如GFP或mCherry，同時(shí)允許具有非常高分配系數(shù)的NTR及其貨物復(fù)合物進(jìn)入。此外，流動(dòng)物種在黏合FG相中的分配系數(shù)是其NPC通過(guò)率的一個(gè)很好的預(yù)測(cè)指標(biāo)，這兩個(gè)參數(shù)在四個(gè)數(shù)量級(jí)范圍內(nèi)具有良好的相關(guān)性。因此，這種體外重建的FG相為研究NPC屏障的性質(zhì)及其與NTRs的相互作用提供了方便的方法。

HIV-1感染需要病毒基因組的核進(jìn)入。先前的證據(jù)表明，這種進(jìn)入通過(guò)核孔復(fù)合物(NPC)進(jìn)行，120 × 60 nm的衣殼通過(guò)約60 nm寬的中央通道擠壓1并穿過(guò)NPC的滲透性屏障。這種屏障可以被描述為FG相，它由粘合相互作用的苯丙氨酸-甘氨酸(FG)重復(fù)體組裝而成，并選擇性地滲透到核轉(zhuǎn)運(yùn)受體(NTRs)捕獲的貨物中。

近日，科研人員發(fā)現(xiàn)HIV-1衣殼組裝可以以一種與ntr無(wú)關(guān)的方式有效地靶向npc，并直接結(jié)合幾種類型的FG重復(fù)序列，包括屏障形成的內(nèi)聚重復(fù)序列。像NTRs一樣，衣殼很容易分裂成體外組裝的內(nèi)聚FG相，可以作為NPC模擬物，不包括更小的惰性探針，如mCherry。事實(shí)上，衣殼組裝極大地增強(qiáng)了衣殼蛋白進(jìn)入FG相的能力，這也允許被封裝的客戶端進(jìn)入。因此，數(shù)據(jù)表明HIV-1衣殼的行為類似于NTR，其內(nèi)部充當(dāng)貨物集裝箱。由于用反式NTRs涂覆衣殼會(huì)使直徑增加10納米或更多，科研人員認(rèn)為這種“自易位"衣殼破壞了NPC支架施加的尺寸限制，從而繞過(guò)了病毒感染的有效屏障。