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這些重點(diǎn)要關(guān)注!盤點(diǎn)預(yù)防『細(xì)胞污染』的小竅門!

更新時間:2023-05-06  |  點(diǎn)擊率:478

細(xì)胞污染是指在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中,外來的生物或物質(zhì)進(jìn)入培養(yǎng)體系中并繁殖生長,影響細(xì)胞的正常生長和實(shí)驗(yàn)結(jié)果,主要包括以下幾點(diǎn):

 

  • 細(xì)胞生長和增殖受到抑制。細(xì)胞污染會占用培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)和氧氣,導(dǎo)致細(xì)胞的生長和增殖受到抑制,甚至?xí)?dǎo)致細(xì)胞死亡。

  • 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性受到影響。細(xì)胞污染會導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)異常的數(shù)據(jù)和結(jié)果,影響實(shí)驗(yàn)的可靠性和準(zhǔn)確性。在一些研究中,細(xì)胞污染甚至?xí)?dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗,浪費(fèi)時間和資源。

  • 細(xì)胞的基因表達(dá)和細(xì)胞功能受到影響。細(xì)胞污染可能會導(dǎo)致細(xì)胞基因表達(dá)水平的改變和細(xì)胞功能的異常。這些異??赡軙诲e誤地歸因于實(shí)驗(yàn)因素而掩蓋真正的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

細(xì)胞污染對細(xì)胞培養(yǎng)的影響非常嚴(yán)重,因此,進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時,需要提高警惕,盡可能降低細(xì)胞污染的可能性。
 

預(yù)防污染的關(guān)鍵點(diǎn)

Cell Culture

 

這里,我們總結(jié)了一些常見的污染“雷區(qū)",幫助大家盡可能“掃除"細(xì)胞培養(yǎng)過程中障礙。如有遺漏,歡迎小伙伴們在評論區(qū)中補(bǔ)充。

 

雷區(qū)一:解凍過程操作不當(dāng)

水面超過冷凍管蓋沿×

 

正常情況下,細(xì)胞凍存管內(nèi)部為無菌設(shè)計(jì),保障細(xì)胞安全。解凍時,凍存管的蓋子下邊緣應(yīng)位于水浴鍋頁面上方,避免其接觸水面。

 

另外,需要定期清潔水浴鍋,為水浴鍋更換無菌水。可以使用德國MB水浴環(huán)境專用的支原體祛除試劑:Water Shield。

 

雷區(qū)二:培養(yǎng)基配制過程操作不當(dāng)

忽視無菌操作,導(dǎo)致培養(yǎng)基被污染×

在整個細(xì)胞培養(yǎng)過程中,都應(yīng)注意無菌操作。在細(xì)胞培養(yǎng)基配好后,建議先抽取少許放入培養(yǎng)瓶/培養(yǎng)皿內(nèi),在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)放置24~48h,檢測培養(yǎng)液是否有污染。

胎牛血清的品質(zhì)對于細(xì)胞培養(yǎng)而言也是十分重要的。選擇一款內(nèi)毒素含量低、通過各項(xiàng)無菌檢測的胎牛血清,既保證了實(shí)驗(yàn)安全,又可以在一定程度上確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定。

Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清,內(nèi)毒素含量≤3EU/ml,各項(xiàng)微生物均為未檢出。

 

雷區(qū)三:沒有定期維護(hù)實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生

實(shí)驗(yàn)垃圾不及時清理,實(shí)驗(yàn)環(huán)境不及時清潔×

要根據(jù)使用頻率定期清潔實(shí)驗(yàn)室,包括超凈臺操作臺面;細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室臺面;培養(yǎng)箱、冰箱、水浴鍋、離心機(jī)、顯微鏡等實(shí)驗(yàn)設(shè)備及儀器等。

德國MB的Mycoplasma-off,支原體祛除噴霧劑,可在幾分鐘內(nèi)迅速殺除支原體、真菌、細(xì)菌等微生物,可在幾分鐘內(nèi)迅速殺除支原體。


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