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微生物法測(cè)定葉酸含量的改進(jìn)

更新時(shí)間:2018-09-11  |  點(diǎn)擊率:1707

葉酸是乳酸桿菌生長(zhǎng)的必需營(yíng)養(yǎng)素,微生物法檢測(cè)葉酸是利用乳酸桿菌生長(zhǎng)速度與葉酸含量相關(guān)的原理建立的。與其他葉酸檢測(cè)的方法相比,微生物法具有許多優(yōu)點(diǎn):樣品預(yù)處理簡(jiǎn)單、對(duì)設(shè)備要求不高、成本低廉等。

 

許多機(jī)構(gòu)都將微生物法作為葉酸分析的標(biāo)準(zhǔn)方法,我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《嬰幼兒配方食品和乳粉通用檢驗(yàn)方法》中測(cè)定葉酸的方法即為微生物法。1988 年 Horrne 等應(yīng)用 96 孔細(xì)胞培養(yǎng)板以干酪乳酸桿菌(Lactobacillias Casei)對(duì)葉酸進(jìn)行微量檢測(cè),將甘油冷凍保存乳酸桿菌與96孔酶標(biāo)板相結(jié)合,使得測(cè)定時(shí)間大為縮短。菌株對(duì)多數(shù)葉酸形式反應(yīng)相似,能測(cè)定單和多谷氨酸葉酸,靈敏度很高,能達(dá)到ng 水平,具有較高的靈敏度和重現(xiàn)性。

 

這一方法對(duì)菌種的處理、分裝和保存,以及操作過(guò)程都作了重大改進(jìn),已被認(rèn)為是目前可靠、簡(jiǎn)便、迅速和微量檢測(cè)葉酸的方法。

 

 

 

96 孔板微生物法測(cè)葉酸能夠獲得準(zhǔn)確、可靠、重復(fù)性好的結(jié)果。稀釋倍數(shù)對(duì)測(cè)定結(jié)果影響不大,結(jié)果穩(wěn)定。考慮其成本低廉,樣本預(yù)處理簡(jiǎn)單以及對(duì)設(shè)備要求不高等優(yōu)點(diǎn),適合于大批量測(cè)定,可用于大樣本的血液流行病學(xué)研究。此方法還可用于其他生物組織和食品中葉酸含量的測(cè)定,這對(duì)國(guó)內(nèi)開展葉酸檢測(cè)有著較大的意義。

 

應(yīng)用96孔板法測(cè)定葉酸含量時(shí),選擇測(cè)定用葉酸培養(yǎng)基,這里推薦的是上HiMedia公司生產(chǎn)的葉酸測(cè)定用培養(yǎng)基(貨號(hào):M543),該培養(yǎng)基由Himedia Laboratories生產(chǎn),嚴(yán)格遵循標(biāo)準(zhǔn),國(guó)產(chǎn)葉酸培養(yǎng)基含有痕量葉酸,易導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果偏高,實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性比較差,HiMedia葉酸測(cè)定用培養(yǎng)基有認(rèn)證的GMP,CE和FDA,ISO9001,ISO13485等證書,成分符合《GB5009.211-2014 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中葉酸的測(cè)定》,測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確性高。

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